研究背景

中药作为中华民族传统医学的瑰宝，历史悠久，资源丰富。从食药同源原料中发掘功能成分，开发健康食品，既传承和发扬了我国“食疗”的传统文化，也是改善国民营养健康状况的现实选择。四君子汤最早出自于北宋时期的《太平惠民和剂局方》，由人参、茯苓、白术、炙甘草等4种原料组成，是应用最为广泛的补益类方剂之一。有研究发现，四君子汤水煎剂中的水溶性多糖含量较高，且具有显著的免疫增强作用，但对4种原料贡献特点的阐释依然延用传统中药理论中“君臣佐使”的理论，缺乏从食品科学及功能成分挖掘的角度用科学数据佐证，不利于其在食疗领域的应用拓展。本研究从食品科学角度探究经典古方中功能物质的贡献特点，挖掘经典古方四君子汤中的关键活性物质，为传统方剂功能特性的科学阐释及其在功能食品领域的应用提供理论支撑。

研究方法

本研究以四君子汤总多糖及单味原料多糖为研究对象，通过腹腔注射环磷酰胺构建免疫抑制小鼠模型，结合体重及免疫器官指数变化、组织病理学分析、免疫球蛋白含量及细胞因子分泌等免疫表型与代谢组学技术，对比探究其免疫调节效果及作用机制。

图1  动物实验分组及给药过程图

结果与分析

本研究结果显示，多糖是四君子汤发挥免疫调节作用的重要功效成分，而四君子汤总多糖与各单味原料多糖的免疫调节作用存在差异化效果。四君子汤总多糖在减缓小鼠体质量下降、改善免疫器官指数方面的效果优于单一多糖组。人参多糖在所有单一多糖中表现最佳，能够有效减缓体质量下降，改善小鼠脾脏和胸腺的免疫器官指数。小鼠脾脏组织病理学分析结果表明，与正常组小鼠脾脏相比，模型组小鼠脾脏表现为红髓和白髓界限模糊、髓质杂乱等现象。与模型组相比，各多糖组小鼠脾脏形态均有一定程度的恢复，髓体界限相对清晰，其中，四君子汤中多糖组和炙甘草多糖组的效果较为显著。

通过检测小鼠血清中的免疫球蛋白IgA、IgG和IgM的含量，发现四君子汤总多糖组小鼠血清中三种免疫球蛋白的水平显著高于模型组，各单一多糖也能不同程度提升小鼠血清中免疫球蛋白的水平，表明四君子汤总多糖及单一多糖均能够增强小鼠体液免疫反应，其中四君子汤总多糖的效果优于单一多糖，人参多糖在各单一多糖中表现最佳。同时，四君子汤总多糖和人参多糖还可以通过增强小鼠脾脏中TNF-α的分泌起到免疫调节作用。

结合非靶向代谢组学分析的结果，发现CTX处理显著改变了小鼠血清中的代谢物轮廓，而多糖的干预能显著改变免疫抑制小鼠的代谢状态。这些发现不仅揭示了四君子汤总多糖及单味原料多糖在提高免疫功能方面的有效性和差异性，也为理解其作用机制提供了新的视角。

 （a）造模后小鼠的体质量变化；（b）不同多糖干预后小鼠的体质量变化

注：与正常组相比，####表示差异极显著（P<0.0001）；与模型组相比，*表示差异显著（P<0.05），**表示差异极显著（P<0.01）。

图2 小鼠体质量变化

注：与正常组相比，###表示差异极显著（P<0.001），####表示差异极显著（P<0.0001）；与模型组相比，*表示差异显著（P<0.05），**表示差异极显著（P<0.01）。

图3 不同多糖干预对小鼠免疫器官指数变化的影响

注：红色箭头表示红髓，黄色箭头表示白髓。

图4 不同多糖干预对小鼠脾脏组织形态的影响

注：与正常组相比，##表示差异极显著（P<0.01），####表示差异极显著（P<0.0001）；与模型组相比，*表示差异显著（P<0.05），**表示差异极显著（P<0.01），****表示差异极显著（P<0.0001）。

图5 不同多糖干预对小鼠血清中免疫球蛋白含量的影响

注：与正常组相比，####表示差异极显著（P<0.0001）；与模型组相比，*表示差异显著（P<0.05），**表示差异极显著（P<0.01）。

图6 不同多糖干预对小鼠脾脏中TNF-α含量的影响

注：（a）正离子；（b）负离子

图7 小鼠血清样品PCA分析得分图

注：（a）M v.s. N；（b）P v.s. M；（c）RS v.s. M；（d）FL v.s. M；

（e）GC v.s. M；（f）BZ v.s. M；（g）BF v.s. M

图8 各组小鼠血清差异代谢通路分析

结论与讨论

本研究揭示了四君子汤总多糖及其单味原料多糖对免疫抑制小鼠的免疫调节作用及其可能的作用途径，并从食品科学与功效成分挖掘角度用系统性数据佐证了传统中医理论中人参在四君子汤“君臣佐使”中“君药”的角色。本研究虽初步探究了四君子汤总多糖的免疫调节作用及代谢调控途径，但尚未明确其具体作用靶点。未来可以进一步深入探究其在细胞信号转导、基因表达调控等方面的作用，以便更全面地理解多糖对免疫系统的影响，并为开发更高效、更有针对性的免疫调节功能食品提供理论依据。

原文链接：https://kns.cnki.net/kcms2/article/abstract?v=VgZR0u5wRbxqaYrns9WrXZfBKmESTzJeAlHIIFL23uEWAT-sCSD1beqVJdVpiSTocvvsQSF2oW5_npCpPtiSRcqbQzMcYWwI3sZcga3QZi2dVl0Bw5e0kaJtxY60IuZCP_OnQyIpQcUYZmntaCMAPTk5gxzbufL_GXY89PpSWVtSbOgqf4ULvw==&uniplatform=NZKPT&language=CHS